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Étapes spécifiques de la culture cellulaire

1. Équipement commun

1. Équipement en salle de préparation

Distillateur d'eau distillée simple, distillateur d'eau distillée double, réservoir d'acide, four, autocuiseur, armoire de stockage (stockage d'articles non stérilisés), armoire de stockage (stockage d'articles stérilisés), table d'emballage.Équipement dans la salle de préparation de la solution : balance de torsion et balance électronique (pesage des médicaments), pH-mètre (mesure de la valeur PH de la solution de culture), agitateur magnétique (configuration de la salle de solution pour agiter la solution).

2. Équipement de salle de culture

Réservoir d'azote liquide, armoire de stockage (stockage d'articles divers), lampe fluorescente et lampe ultraviolette, système de purificateur d'air, réfrigérateur basse température (- 80 ℃), climatiseur, bouteille de dioxyde de carbone, table d'appoint (rédaction des dossiers de test).

3. Matériel qui doit être placé dans la salle stérile

Centrifugeuse (cellules collectrices), table de travail ultra-propre, microscope inversé, incubateur à CO2 (culture en incubation), bain-marie, machine de désinfection et de stérilisation à trois oxygènes, réfrigérateur 4 ℃ (placement du sérum et de la solution de culture).

 

2、Opération aseptique

(1) Stérilisation de la salle stérile

1. Nettoyez régulièrement la salle stérile : une fois par semaine, utilisez d'abord de l'eau du robinet pour nettoyer le sol, essuyez la table et nettoyez la table de travail, puis utilisez du lysol à 3 ‰ ou de la bromogéramine ou de l'acide peracétique à 0,5 % pour essuyer.

2. Stérilisation de l'incubateur à CO2 (incubateur) : essuyez d'abord avec de la bromogéramine 3 ‰, puis essuyez avec de l'alcool à 75 % ou de l'acide peracétique à 0,5 %, puis irradiez avec une lampe ultraviolette.

3. Stérilisation avant l'expérience : allumez la lampe ultraviolette, le stérilisateur à trois oxygène et le système de purificateur d'air pendant 20 à 30 minutes respectivement.

4. Stérilisation après l'expérience : essuyer la table ultra-propre, la table d'appoint et la platine du microscope inversé avec de l'alcool à 75 % (bromogéramine 3 ‰).

 

 

Préparation à la stérilisation du personnel de laboratoire

1. Lavez-vous les mains avec du savon.

2. Portez des vêtements d’isolation, des casquettes d’isolation, des masques et des pantoufles.

3. Essuyez-vous les mains avec un coton alcoolisé à 75 %.

 

Démonstration d'opération stérile

 

1. Toutes les bouteilles d'alcool, de PBS, de milieu de culture et de trypsine introduites dans l'établi ultra-propre doivent être essuyées avec 75 % d'alcool sur la surface extérieure de la bouteille.

2. Opérez près de la flamme d'une lampe à alcool.

3. Les ustensiles doivent être stérilisés avant utilisation.

4. Les ustensiles (tels que les bouchons de bouteilles et les compte-gouttes) qui continuent à être utilisés doivent être placés en hauteur et doivent toujours être surchauffés pendant l'utilisation.

5. Toutes les opérations doivent être proches de la lampe à alcool, et l'action doit être légère et précise, et ne doit pas être touchée au hasard.Si la paille ne peut pas toucher le réservoir de liquide usé.

6. Lorsque vous aspirez plus de deux types de liquides, veillez à remplacer le tuyau d'aspiration pour éviter toute contamination croisée.

Voir le chapitre suivant pour la désinfection des instruments.

 


Heure de publication : 01 février 2023