Plusieurs enzymes couramment utilisées dans les expériences PCR

Réaction en chaîne par polymérase, en abrégéRAPen anglais, est une technique de biologie moléculaire utilisée pour amplifier des fragments d'ADN spécifiques.Il peut être considéré comme une réplication spéciale de l'ADN en dehors du corps, qui peut augmenter considérablement une très petite quantité d'ADN.Pendant toute laRAPDans le processus de réaction, une classe de substances joue un rôle vital : les enzymes.

1. ADN Taq

Dans les expériences menées au début deRAP, les scientifiques ont utilisé l'ADN polymérase I d'Escherichia coli, mais il y a un problème avec cette enzyme : elle doit reconstituer une nouvelle enzyme à chaque fois qu'un cycle est effectué, ce qui rend les étapes opératoires légèrement compliquées et il est difficile de l'amplifier de manière entièrement automatique.Ce problème a été résolu après que des scientifiques ont accidentellement isolé l'ADN polymérase Taq de Thermus aquatiques en 1988. Depuis lors, l'amplification automatique de l'ADN est devenue une réalité.La découverte de cette enzyme fait égalementRAPtechnologie une technologie commode, pratique et universelle.Actuellement, l’ADN polymérase Taq est la polymérase la plus courante dans les kits ADN.

2. PfuADN

Comme mentionné ci-dessus, la Taq DNase présente un gros bug, c'est pourquoi les scientifiques ont modifié l'ADN polymérase Taq dans une certaine mesure afin d'éviter une amplification non spécifique due à un mésappariement, ce qui entraîne des résultats de test inexacts.Mais la modification de l’ADN polymérase Taq peut inhiber l’activité de l’ADN polymérase à température ambiante.L'ADN polymérase Pfu peut bien compenser les inconvénients ci-dessus de l'ADN polymérase Taq, de sorte que la réaction PCR puisse être effectuée normalement et que le taux de réussite de l'amplification du gène cible puisse être efficacement amélioré.

3. Transcriptase inverse

La transcriptase inverse a été découverte en 1970. Cette enzyme utilise l'ARN comme matrice, le dNTP comme substrat, suit le principe de l'appariement de bases et synthétise un ADN simple brin complémentaire à la matrice d'ARN dans la direction 5′-3'.La transcriptase inverse dépend principalement de l’activité de l’ADN polymérase à partir de matrices d’ADN ou d’ARN et n’a donc aucune activité d’exonucléase 3′-5′.Cependant, il possède une activité RNase H, ce qui limite dans une certaine mesure la durée de synthèse de la transcriptase inverse.En raison de la faible fidélité et de la thermostabilité de la transcriptase inverse sauvage, les scientifiques l’ont également modifiée.

PourRAPexpériences, les principaux consommables sont ： tube PCR individuel, tube PCR 4/8 bandes, plaques PCR.

Les lèvresConsommables PCRavoir ce qui suitavantages:

Plaques PCR: Large compatibilité avec les thermocycleurs ;Identification facile et contrastée des puits ;bonne réflexion de fluorescence ; bonnetransfert de chaleur;Certifié DNase, RNase, ADN, inhibiteurs de PCR et testé apyrogène.

Tubes PCR individuels: Résistant à l'évaporation ; bontransfert de chaleur;excellente clarté optique ; DNase certifié, RNase, ADN, inhibiteurs de PCR et testé apyrogène.

Tubes PCR 4/8 barrettes: Parois ultra fines, haute clarté, bonne réflexion de la fluorescence ;peut être utilisé dans l'industrie pharmaceutique, l'industrie alimentaire et la biologie moléculaire ; matériau PP vierge de haute qualité ; DNase certifié, RNase, ADN, inhibiteurs de PCR et testé apyrogène.