Introduction aux milieux de culture microbienne courants (I)

Introduction aux milieux de culture microbienne courants (I)

Le milieu de culture est une sorte de matrice nutritive mixte préparée artificiellement à partir de diverses substances en fonction des besoins de diverses croissances microbiennes, qui est utilisée pour cultiver ou séparer divers micro-organismes.Par conséquent, la matrice nutritive doit contenir des nutriments (y compris une source de carbone, une source d'azote, de l'énergie, du sel inorganique, des facteurs de croissance) et de l'eau pouvant être utilisées par les micro-organismes.Selon le type de micro-organismes et le but de l’expérience, il existe différents types et méthodes de préparation de milieux de culture.

Certains milieux de culture courants dans l’expérience sont présentés comme suit :

Milieu gélose nutritionnel :

Le milieu gélose nutritive est utilisé pour la propagation et la culture de bactéries communes, pour la détermination du nombre total de bactéries, la préservation des espèces bactériennes et la culture pure.Les principaux ingrédients sont : l'extrait de bœuf, l'extrait de levure, la peptone, le chlorure de sodium, la poudre d'agar, l'eau distillée.La peptone et la poudre de bœuf fournissent des sources d'azote, de vitamines, d'acides aminés et de carbone, le chlorure de sodium peut maintenir une pression osmotique équilibrée et la gélose est le coagulant du milieu de culture.

La gélose nutritionnelle est le type de milieu de culture le plus basique, qui contient la plupart des nutriments nécessaires à la croissance microbienne.La gélose nutritionnelle peut être utilisée pour la culture bactérienne de routine.

Milieu gélose au sang :

Le milieu gélose au sang est une sorte de milieu peptoné à l'extrait de bœuf contenant du sang animal défibriné (généralement du sang de lapin ou du sang de mouton).Par conséquent, en plus de divers nutriments nécessaires à la culture des bactéries, il peut également fournir de la coenzyme (comme le facteur V), de l'hème (facteur X) et d'autres facteurs de croissance spéciaux.Par conséquent, le milieu d’hémoculture est souvent utilisé pour cultiver, isoler et conserver certains micro-organismes pathogènes exigeants en nutrition.

De plus, la gélose au sang est généralement utilisée pour le test d’hémolyse.Au cours du processus de croissance, certaines bactéries peuvent produire de l’hémolysine pour briser et dissoudre les globules rouges.Lorsqu'ils se développent sur la plaque sanguine, des anneaux hémolytiques transparents ou translucides peuvent être observés autour de la colonie.Le pouvoir pathogène de nombreuses bactéries est lié à leurs caractéristiques hémolytiques.Étant donné que l'hémolysine produite par différentes bactéries est différente, la capacité hémolytique est également différente et le phénomène d'hémolyse sur la plaque sanguine est également différent.Par conséquent, le test d’hémolyse est souvent utilisé pour identifier les bactéries.

Milieu TCBS :

TCBS est un milieu de gélose au saccharose, sels biliaires, thiosulfate et citrate.Pour l’isolement sélectif des vibrions pathogènes.La peptone et l'extrait de levure sont utilisés comme nutriments de base dans le milieu de culture pour fournir une source d'azote, une source de carbone, des vitamines et d'autres facteurs de croissance nécessaires à la croissance des bactéries ;La concentration plus élevée de chlorure de sodium peut répondre aux besoins de croissance halophile du vibrion ;Saccharose comme source de carbone fermentescible ;Le citrate de sodium, l'environnement alcalin à pH élevé et le thiosulfate de sodium inhibent la croissance des bactéries intestinales.La poudre de bile de vache et le thiosulfate de sodium inhibent principalement la croissance des bactéries à Gram positif.De plus, le thiosulfate de sodium constitue également une source de soufre.En présence de citrate ferrique, le sulfure d'hydrogène peut être détecté par les bactéries.S'il y a des bactéries produisant du sulfure d'hydrogène, des sédiments noirs seront générés sur la plaque ;Les indicateurs du milieu TCBS sont le bleu de bromocrésol et le bleu de thymol, qui sont des indicateurs acido-basiques.Le bleu de bromocrésol est un indicateur acido-basique avec une plage de changement de pH de 3,8 (jaune) à 5,4 (bleu-vert).Il existe deux plages de décoloration : (1) la plage d'acide est de pH 1,2 à 2,8, passant du jaune au rouge ;(2) La plage alcaline est de pH 8,0 à 9,6, passant du jaune au bleu.

Milieu de gélose peptone de soja et de fromage TSA :

La composition du TSA est similaire à celle de la gélose nutritive.Dans la norme nationale, il est généralement utilisé pour tester les bactéries qui se déposent dans les salles blanches (zones) de l'industrie pharmaceutique.Sélectionnez le point de test dans la zone à tester, ouvrez la plaque TSA et placez-la sur le point de test.Les échantillons doivent être prélevés lorsqu'ils sont exposés à l'air pendant plus de 30 minutes à différents moments, puis cultivés pour le comptage des colonies.Différents niveaux de propreté nécessitent différents décomptes de colonies.

Gélose Mueller Hinton :

Le milieu MH est un milieu microbien utilisé pour détecter la résistance des micro-organismes aux antibiotiques.C'est un milieu non sélectif sur lequel la plupart des micro-organismes peuvent se développer.De plus, l'amidon contenu dans les ingrédients peut absorber les toxines libérées par les bactéries, cela n'affectera donc pas les résultats de l'opération antibiotique.La composition du milieu MH est relativement lâche, ce qui favorise la diffusion des antibiotiques, de sorte qu'elle puisse présenter une zone d'inhibition de croissance évidente.Dans l'industrie chinoise de la santé, le milieu MH est également utilisé pour les tests de sensibilité aux médicaments.Lors de tests de sensibilité aux médicaments pour certaines bactéries spéciales, telles que Streptococcus pneumoniae, 5 % de sang de mouton et de NAD peuvent être ajoutés au milieu pour répondre à différents besoins nutritionnels.

Gélose SS :

La gélose SS est généralement utilisée pour l’isolement sélectif et la culture de Salmonella et Shigella.Il inhibe les bactéries Gram-positives, la plupart des coliformes et les protées, mais n'affecte pas la croissance des salmonelles ;Le thiosulfate de sodium et le citrate ferrique sont utilisés pour détecter la génération de sulfure d'hydrogène, rendant le centre de la colonie noir ;Le rouge neutre est l'indicateur de pH.La colonie de sucre en fermentation produisant de l'acide est rouge et la colonie de sucre non en fermentation est incolore.Salmonella est une colonie incolore et transparente avec ou sans centre noir, et Shigella est une colonie incolore et transparente.