Un tube à centrifuger est un tube simple qui peut résister à une vitesse de rotation et à une pression élevées, telles que la séparation de certains échantillons et la séparation des sédiments surnageants.Le tube à centrifuger d'ultrafiltration comporte deux parties similaires au tube intérieur et au tube extérieur.La chambre à air est une membrane ayant un certain poids moléculaire.Lors d'une centrifugation à grande vitesse, ceux ayant un poids moléculaire plus faible s'échapperont dans le tube inférieur (c'est-à-dire le tube extérieur), et ceux ayant un poids moléculaire plus élevé seront piégés dans le tube supérieur (c'est-à-dire le tube intérieur).C’est le principe de l’ultrafiltration et est souvent utilisé pour concentrer des échantillons.
Les tubes à centrifuger d'ultrafiltration peuvent généralement être utilisés sans prétraitement, mais pour le traitement d'échantillons de protéines, en particulier pour les solutions de protéines diluées (< 10 ug/ml), le taux de récupération de la concentration avec les membranes d'ultrafiltration n'est souvent pas quantitatif.Bien que les matériaux PES minimisent l’adsorption non spécifique, certaines protéines, notamment lorsqu’elles sont diluées, peuvent rencontrer des problèmes.Le degré de liaison non spécifique varie en fonction de la structure des protéines individuelles.Les protéines contenant des domaines chargés ou hydrophobes sont plus susceptibles de se lier de manière irréversible à différentes surfaces.Le prétraitement de passivation sur la surface du tube à centrifuger d'ultrafiltration peut réduire la perte d'adsorption de protéines sur la surface de la membrane.Dans la plupart des cas, le prétraitement de la colonne avant de concentrer la solution diluée de protéines peut améliorer le taux de récupération, car la solution peut remplir les sites d'adsorption de protéines vierges exposés sur la membrane et la surface.La méthode de passivation consiste à pré-tremper la colonne avec un volume plus élevé de solution de passivation pendant plus d'une heure, à la laver soigneusement avec de l'eau distillée, puis à la centrifuger une fois avec de l'eau distillée pour éliminer complètement la solution de passivation qui peut rester sur le film. .Attention à ne pas laisser sécher le film après passivation.Si vous souhaitez l'utiliser plus tard, vous devez ajouter de l'eau distillée stérile pour garder le film humide.
Les tubes à centrifuger par ultrafiltration ne peuvent généralement pas être stérilisés et réutilisés.Comme le prix d’un tube unique n’est pas bon marché, de nombreuses personnes essaient de le réutiliser – l’expérience consiste à nettoyer la surface de la membrane avec de l’eau distillée plusieurs fois et à la centrifuger une ou deux fois.Le petit tube qui peut être centrifugé à l'envers peut être immergé dans de l'eau distillée puis centrifugé à l'envers plusieurs fois, ce qui sera mieux.Il peut être utilisé à plusieurs reprises pour le même échantillon et peut être trempé dans de l'eau distillée lorsqu'il n'est pas utilisé, mais la contamination bactérienne doit être évitée.Ne mélangez pas différents échantillons.Certaines personnes disent que le trempage dans 20 % d'alcool et 1n de NaOH (hydroxyde de sodium) peut empêcher la croissance des bactéries et empêcher le séchage.Tant que la membrane d’ultrafiltration envahit l’eau, elle ne peut pas sécher.Cependant, d’autres disent que cela détruirait la structure de la membrane.Quoi qu’il en soit, les fabricants ne soutiennent généralement pas la réutilisation.Une utilisation répétée bloquera la taille des pores de la membrane filtrante et provoquera même des fuites de liquide, ce qui affectera les résultats expérimentaux.
Heure de publication : 05 septembre 2022